52遺傳物質(zhì)提取與粗分離

　　對(duì)于各種細(xì)胞的性質(zhì)差異而言，主要是由DNA決定的。

　　但是——

　　DNA具體是什么樣子的呢？所以，我們就來(lái)探討一下DNA的粗提取與鑒定，

　　首先，咱們要來(lái)分析一下DNA的狀態(tài)。通過(guò)以前的大量實(shí)驗(yàn)，我們便已經(jīng)知道了DNA的性質(zhì)是白色的絲狀物。

　　在提取高純度DNA時(shí)，需要應(yīng)用的有十六烷基三甲基溴化氨，這個(gè)物質(zhì)的簡(jiǎn)稱(chēng)CTAB。

　　還有就是十二烷基硫酸鈉簡(jiǎn)稱(chēng)為SBS。

　　而且，對(duì)于DNA與蛋白質(zhì)的溶解度而言，存在著一定的差異。具體來(lái)說(shuō)，就是DNA的溶解度是在0.14摩爾每升的氯化鈉溶液當(dāng)中溶解度最低。

　　但是——

　　蛋白質(zhì)卻是和DNA這種溶解差異大體相反。

　　蛋白質(zhì)溶解度大體不變，所以在提取DNA時(shí)，可以采用改變DNA溶解度的方式從而來(lái)控制DNA的分離。

　　但是DNA這種物質(zhì)還不會(huì)溶于酒精溶液，這個(gè)性質(zhì)和許多物質(zhì)不同。

　　而且DNA還具有耐高溫的性質(zhì)，蛋白質(zhì)在60到80攝氏度時(shí)已經(jīng)開(kāi)始了變性失活。

　　而DNA則在80攝氏度以上才會(huì)發(fā)生變性。而且，當(dāng)升高到80攝氏度以上的溫度之后，如果緩慢的降溫，最后DNA還會(huì)隨著溫度的降低會(huì)緩慢復(fù)原。

　　DNA不受蛋白酶的影響。蛋白酶當(dāng)然是可以水解蛋白質(zhì)的了，畢竟它叫蛋白酶。

　　洗滌劑可以瓦解細(xì)胞膜，但是對(duì)DNA也是沒(méi)有影響的。所以在我們提取DNA的過(guò)程中，也需要用洗滌劑進(jìn)行洗滌，以瓦解細(xì)胞為目的。

　　了解了DNA的性質(zhì)，再談?wù)凞NA的鑒定，實(shí)際就是二苯胺試劑。并且要現(xiàn)配現(xiàn)用。否則不會(huì)有效果或者效果十分不明顯。

　　接下來(lái)就是具體的實(shí)驗(yàn)了，實(shí)驗(yàn)的原理就是：DNA加上二苯胺試劑后，再在水浴加熱的條件下溶液會(huì)變成藍(lán)色。

　　首先是細(xì)胞的選擇，選用細(xì)胞時(shí)不可以用哺乳動(dòng)物的成熟紅細(xì)胞。

　　因?yàn)椴溉閯?dòng)物的成熟紅細(xì)胞沒(méi)有細(xì)胞核和眾多細(xì)胞器，所以使用哺乳動(dòng)物的成熟紅細(xì)胞更容易獲得蛋白質(zhì)，但是絕對(duì)得不到DNA。

　　所以在血紅蛋白的提取過(guò)程中，可以使用哺乳動(dòng)物的成熟紅細(xì)胞比較便利，但是提取DNA絕不可以用這種細(xì)胞。

　　最后就是對(duì)細(xì)胞進(jìn)行粉碎處理。

　　對(duì)于動(dòng)物細(xì)胞，我們可以使用水滴吸水脹破的方法進(jìn)行。破碎就是向動(dòng)物細(xì)胞溶液當(dāng)中加入足量的蒸餾水，這樣就可以使細(xì)胞破裂，從而進(jìn)行粉碎。

　　而植物細(xì)胞則需要加入洗滌劑還有食鹽進(jìn)行研磨，因?yàn)橹参锛?xì)胞存在的細(xì)胞壁具有保護(hù)支撐的作用，必須先將細(xì)胞壁進(jìn)行一系列的操作，從而將細(xì)胞壁徹底粉碎在破裂。

　　之后就是除去雜質(zhì)，除去雜質(zhì)大致是利用溶解度的差異。就是前面我們講過(guò)的性質(zhì)：DNA在0.14摩爾每升的氯化鈉溶液中溶解度最低，而蛋白質(zhì)沒(méi)有這一系列的變化，從而進(jìn)行分離提取。

　　所以我們就會(huì)在在0.14摩爾每升的氯化鈉溶液時(shí)，我們選取沉淀作為后續(xù)反應(yīng)物質(zhì)。

　　在2摩爾每升的氯化鈉溶液中，我們?cè)赣萌芤哼M(jìn)行購(gòu)物反應(yīng)。

　　接著我們加入嫩肉粉，因?yàn)樵谀廴夥壑泻心竟系鞍酌?，這種酶可以分解蛋白質(zhì)。

　　這種蛋白酶可以進(jìn)行蛋白質(zhì)的分解。

　　最后，就是要將濾液加入到60到75攝氏度的恒溫水浴箱中加入要嚴(yán)格要求溫度范圍。這個(gè)過(guò)程的目的就是將蛋白質(zhì)進(jìn)行變性處理。從而達(dá)到過(guò)濾的目的。

　　之后就要進(jìn)行DNA的析出與鑒定了。

　　DNA的析出需要加入百分之九十五的酒精溶液，從而可以產(chǎn)生白色的絲狀物，這白色的絲狀物就是DNA分子。

　　最后就需要對(duì)DNA分子進(jìn)行鑒定。那么，我們需要將白色物質(zhì)用玻璃棒取出。在取出的時(shí)候一定要輕輕的攪拌，防止DNA分子斷裂，從而達(dá)不到實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮蛯?shí)驗(yàn)現(xiàn)象結(jié)果。

　　之后便將白色絲狀物用濾紙吸干水分，放入到兩摩爾每升的氯化鈉溶液當(dāng)中，再加入200ml二苯胺溶液進(jìn)行水浴加熱。

　　之后就可以直接觀察現(xiàn)象啦！